分子互作检测

信息概要

分子互作检测是指通过生物物理和生物化学方法研究生物分子之间的相互作用，如蛋白质、核酸、小分子等。该检测在药物研发、疾病机制研究和生物技术领域具有关键重要性，能够评估结合亲和力、动力学参数等，为科学决策提供可靠数据。

检测项目

结合常数, 解离常数, 亲和力常数, 结合速率常数, 解离速率常数, 平衡常数, 半最大效应浓度, 抑制常数, 激活常数, 受体占据率, 配体效率, 结合选择性, 结合可逆性, 结合持久性, 结合动力学曲线, 结合等温线, 结合热力学参数, 结合动力学参数, 结合亲和力指数, 结合特异性指数, 结合位点数, 结合自由能, 结合熵, 结合热, 协同系数, 变构常数, 竞争性抑制常数, 非竞争性抑制常数, 混合型抑制常数, 解离半衰期

检测范围

蛋白质-蛋白质相互作用, 蛋白质-DNA相互作用, 蛋白质-RNA相互作用, 蛋白质-小分子相互作用, 抗体-抗原相互作用, 酶-底物相互作用, 受体-配体相互作用, DNA-DNA相互作用, RNA-RNA相互作用, 核酸-蛋白质相互作用, 脂质-蛋白质相互作用, 碳水化合物-蛋白质相互作用, 病毒-宿主蛋白相互作用, 细胞因子-受体相互作用, 激素-受体相互作用, 药物-靶点相互作用, 毒素-受体相互作用, 信号转导通路相互作用, 免疫复合物相互作用, 代谢酶-底物相互作用, 基因调控因子-DNA相互作用, 结构蛋白相互作用, 功能蛋白相互作用, 动态分子相互作用, 静态分子相互作用, 可逆相互作用, 不可逆相互作用, 共价键相互作用, 非共价键相互作用, 疏水相互作用

检测方法

表面等离子共振（SPR）：实时监测分子结合和解离的动力学过程，提供高精度亲和力数据。

等温滴定量热法（ITC）：直接测量结合反应中的热变化，用于获取热力学参数。

荧光共振能量转移（FRET）：通过荧光信号检测分子间的接近度和相互作用。

生物层干涉术（BLI）：利用光干涉原理实时分析分子结合，适用于高通量筛选。

酶联免疫吸附试验（ELISA）：通过酶标抗体检测特定分子互作，常用于临床样本。

免疫共沉淀（Co-IP）：利用抗体沉淀蛋白质复合物，研究蛋白质相互作用网络。

酵母双杂交系统：通过酵母报告基因筛选蛋白质间的直接或间接相互作用。

噬菌体展示：利用噬菌体表达库筛选与靶分子结合的多肽或蛋白质。

核磁共振（NMR）：基于原子核磁矩研究分子结构和动态相互作用。

X射线晶体学：通过晶体衍射获得高分辨率分子互作结构信息。

圆二色谱（CD）：测量圆二色性变化，分析分子二级结构互作效应。

动态光散射（DLS）：通过光散射分析分子大小和聚集状态，间接评估互作。

分析超速离心：利用离心力研究分子质量和结合平衡，适用于复杂体系。

微量热泳动（MST）：基于温度梯度测量结合亲和力，所需样品量少。

荧光偏振（FP）：通过偏振光变化检测小分子与大分子的结合事件。

检测仪器

Biacore T200, Octet RED96, MicroCal ITC200, SpectraMax i3x, Typhoon FLA 9500, NanoDrop One, Qubit 4 Fluorometer, Agilent 2100 Bioanalyzer, Beckman Coulter Allegra X-15R, Eppendorf Centrifuge 5430, Thermo Fisher Scientific Heraeus Megafuge 16, Bio-Rad ChemiDoc MP, LI-COR Odyssey CLx, PerkinElmer EnVision, Tecan Infinite M200